Действие ингибиторов на активность L-метионин-γ-лиазы из Pseudomona staetrolents

Изучено действие ингибиторов на активность L-метионин-γ-лназы из Pseudomonas taetrolents. Показано, что фермент высоко чувствителен к действию карбонильных ингибиторов: L-пенициламину, L-циклосерину и гидро-ксиламину. В присутствии этих ингибиторов активность исчезала полностью для гидроксиламина или уменьшалась на 80-93% для остальных ингибиторов. При этом оказалось, что действие пенициламина и циклосерина носит необратимый характер, тогда как гидроксиламин действовал обратимо. Активность фермента восстанавливалась на 80-85% после удаления пиридоксальфосфат гидроксиламиного комплекса гель-фильтрацией и последующего добавления к апоферменту пиридоксальфосфата. Полученные результаты позволили отнести изучаемый фермент к подгруппе элиминирующих полифункциональных лиаз. Оказалось, что L-метиопин-γ-лиаза высокочувствительна к реагентам на тиоловые группы: п-хлормеркурийбензоату, N-этилмалеимиду. иодуксусной кислоте. Эти результаты свидетельствуют о том, что в молекуле фермента присутствуют функционально значимые SH-группы.

The effect of inhibitors on the activity of L-mehtionine y-lyase from Pseudomonas staetrolents

The effect of several inhibitors on the activity of purified L-methionine γ-lyase from Pseudomonas taetrolens was studied. It was shown that enzyme is extremity, sensitive to the action of carbonyl reagents (L-penicilamine, L-cycloserine and hydroxylamine). In the presence of hydroxylamine the enzyme activity was no detected at all, while with other inhibitor 7-20 % of initial activity was preserved. Moreover if the inhibition ofenzyme activity by L-penicilamine and cycloserine has irreversible manner, the inhibition by hydroxylamine was reversible. The activity ofenzyme could be recovered to 80-85 % after the removing of pyridoxale-phosphate-hydroxylamine complexe by gel-filtration method and after adding the pure pyridoxale phosphate to the apoenzyme. The data obtained allow to suggest that methionine γ-lyases may be included to the subgroup of eliminating polyfunctional lyases. Besides, the enzyme was high sensitive to the reagents of thyol group, and particularly to p-chlore mercury benzoate, N-cthylmaleyamide and iodine acetate. These data give the basis for supposition that there are the functionally important SH-groups in the enzyme molecule.